摘要：目的 探讨和分析免疫细胞化学鉴别胸腹水脱落细胞在肿瘤诊断中的应用价值。方法 采用免疫细胞化学的方法，观察50例患者的胸腹水脱落细胞中抗体上皮细胞膜抗原（EMA）、钙结合素（PCNA）、细胞角蛋白（CK）、肢纹蛋白（VIM）、CAL、P53蛋白、癌胚抗原（CEA）的表达情况，以此判断细胞类型。结果 癌细胞EMA、CK（+），部分P53蛋白、CEA、PCNA（+），部分CAL、VIM（-）、恶性间皮瘤细胞、间皮细胞的VIM、CAL（+），部分PCNA、EMA、CK（+），CEA（-）。联合胸腹水脱落细胞学和蛋白表达检测，50例胸腹水脱落细胞检出恶性肿瘤患者30例，良性肿瘤患者20例。结论 免疫细胞化学技术有助于判断胸腹水的性质和肿瘤类型，与抗体联合应用能进一步提高检出准确率。
关键词：免疫细胞化学；胸腹水；肿瘤；价值
胸腹水是临床常见的疾病之一,由于其病因的复杂性，判断其良、恶性对疾病的诊治显得尤为重要［1］。近几年来，由于免疫学检测技术的不断发展和完善以及抗原纯化和抗体制备技术的改良，免疫细胞化学技术（ICC）已经成为辅助细胞病理学鉴别诊断胸腹水良、恶病变的主要手段之一［2］。本文利用ICC联合胸腹水脱落细胞学检测技术，鉴别了50例患者胸腹水的性质及肿瘤类型，有效地提高了胸腹水病理诊断的准确率。现将结果报告如下。
1资料与方法
1.1一般资料 选取2010年10月~2013年10月50例胸腹水患者，其中男性30例,女性20例。胸水28例,腹水22例。年龄22～80岁,平均年龄(53±2.3)岁。
1.2方法
1.2.1细胞学涂片的制备将通过胸腹腔穿刺获取的新鲜胸腹水100mL送检,经过沉淀后，丢弃上清，将剩余物(约40mL)以2000rpm/min的转速离心10min.用吸管将沉淀析出，涂片两张HE常规染色观察,用经防脱胶处理的玻片涂片6张,冷丙酮固定,用作免疫细胞化学染色［3］。
1.2.2免疫细胞化学方法：鼠抗人单克隆抗体抗体为EMA、PCNA、CK、VIM、CAL、P53蛋白、CEA。滴加一滴3%的H2O2室温温孵15min以消除内源性过氧化物酶的活性。用5%正常羊血清封闭，接着先加入一抗37℃恒温箱孵育，1h后用PBS洗5遍，再加入HRP孵育30min,DAB显色,苏木素复染,中性树胶封固,每组涂片均设阳性对照片［4］。
1.2.3显微镜观察观察抗体EMA、CEA、CK、VIM、CAL、P53蛋白、PCNA在细胞中的表达情况，以判断细胞的类型，同时与常规细胞学进行比较。
1.2.4阳性标准［5］参考组织学原则，如果EMA、CEA、CK、VIM、CAL的胞膜或胞膜、胞质呈现棕黄色即为阳性，并且依据棕黄色的强度分强阳性、弱阳性，若胞膜或胞质未出现棕黄色则为阴性；P53蛋白、PCNA的胞核呈棕黄色即为阳性，未出现棕黄色则为阴性。
1.3统计学方法 应用SPSS17.0软件处理数据，计数资料用例数进行表示，使用χ2检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。
2结果
50例患者经过HE法诊断，结果显示：腺癌细胞20例，鳞癌细胞15例，增生间皮细胞10例，恶性肿瘤细胞5例，ICC法诊断结果显示：腺癌细胞19例，鳞癌细胞16例，增生间皮细胞9例，恶性肿瘤细胞6例。50例胸腹水患者采取不同检查方法的诊断结果比较见表1。50例胸腹水免疫细胞化学染色标记结果见表2。
3讨论
临床上主要是通过常规脱落细胞病理学检查和生化指标来诊断胸腹水的性质，这两种方法的缺陷是恶性检出率低。而胸腹水细胞学HE检测最大的缺陷为较难鉴别出腺癌细胞与增生或部分变性间皮细胞，同时难以对某些恶性肿瘤细胞进行分型［6］。而免疫细胞化学技术使细胞学诊断从单纯的形态学观察提高到了特异性抗原水平, 大大提高了胸腹水恶性肿瘤的诊断水平［7］。
本研究通过对50例胸腹水患者采用免疫细胞化学联合检测，确定了患者的肿瘤类型及良恶性，准确率较高。因此，将细胞形态学诊断与免疫细胞化学联合应用,可以很好的鉴别恶性肿瘤细胞的类型，同时能够解决良恶性的诊断鉴别问题,在临床上值得推广应用。
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编辑/许言
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